Phương pháp kjeldahl là gì

/Pmùi hương pháp thực nghiệm về tối ưu hóa cho phép khẳng định lượng chất Nitơ (Nitrogen) kết quả bao gồm trong mẫu hóa học bằng hệ thống chưng cất đạm J.Phường Selecta theo cách thức Kendan (Kjeldahl)
*

Hàm lượng Protein (đạm) toàn bô trong thực phẩm được chế tác thành từ bỏ các thành phần hỗn hợp protein phức hợp. Chúng vĩnh cửu trong sự kết hợp với carbohydrate hoặc lipit, hoàn toàn có thể là đồ vật lý hoặc hóa học. Hiện tại, tất cả các phương thức xác minh hàm vị protein tổng cộng của thực phđộ ẩm đều sở hữu đặc điểm thực nghiệm. Một phương thức hoàn hảo nhất là xa lánh với cân trực tiếp protein mà lại phương thức này chỉ được áp dụng nhiều lúc vào nghiên cứu sinh hóa, vì chưng nó khôn xiết khó khăn cùng cũng ko thực tiễn lắm.

Bạn đang xem: Phương pháp kjeldahl là gì

Năm 1883, công ty nghiên cứu người Đan Mạch Johann Kjeldahl đã trở nên tân tiến cách thức được thực hiện những độc nhất vô nhị đến lúc này, để đối chiếu protein (Call tắt là cách thức Kjeldahl) bằng cách xác minh nitơ hữu cơ. Trong chuyên môn này, protein và các yếu tắc hữu cơ khác của thực phẩm được phân bỏ vào lếu phù hợp với axit sulfuric lúc xuất hiện hóa học xúc tác. Nitơ cơ học tổng thể được biến đổi bằng phương pháp phân diệt trong amoni sulfat. Hỗn hợp phân bỏ được dung hòa với 1 bazơ cùng chưng đựng sau đó. Sản phẩm bác bỏ cất được thu nhấn vào dung dịch axit boric. Các anion borat sinh sản thành được chuẩn chỉnh độ bằng HCl đã làm được chuẩn hóa (hoặc H2SO4) để khẳng định hàm lượng nitơ vào mẫu mã.

Kết trái so với là 1 hàm vị protein thô sấp xỉ của mẫu mã hóa học thực phẩm vì nitơ cũng tới từ những yếu tố phi protein.

Phương pháp Kjeldahl đã trải qua một vài sửa đổi. Ban đầu, kali permanganat được áp dụng để thực hiện quá trình oxy hóa (phân hủy); tuy vậy, tác dụng không đạt yên cầu, cho nên vì thế dung dịch demo vẫn bị loại bỏ. Năm 1885, Wilforth thấy rằng phân hủy hoàn toàn có thể tăng tốc độ bằng phương pháp áp dụng axit sulfuric cùng thêm hóa học xúc tác. Gunning năm 1889 đề xuất bổ sung cập nhật kali sulfat, có tác dụng tăng điểm sôi của axit sulfuric được áp dụng vào quy trình oxyhóa, để sút thời gian bội nghịch ứng.

Ngày nay, đồng sulfate pent hydrated CuSO4.5H2O được thực hiện hầu hết làm cho chất xúc tác.

CÁC ỨNG DỤNG

Từ năm 1883, Lúc John Kjeldahl trình bày phương pháp của mình, cách thức của ông đã có gật đầu rộng thoải mái với được áp dụng trong vô số nghành nghề khác biệt nhằm so với thực phẩm, thức uống, thức ăn, ngũ cốc, thịt, nước thải, khu đất trồng cây. Ngày ni ,phương thức của ông được sử dụng rộng rãi tốt nhất để đối chiếu protein và được tiến hành bằng phương pháp xác định nitơ cơ học. Vấn đề này là vì các một số loại protein không giống nhau trùng với toàn bộ trong một Phần Trăm tương tự như của nitơ cơ học . Trong số đông các ngôi trường hợp, hệ số tính toán sau được sử dụng:

Hàm lượng protein = hàm vị nitơ hữu cơ x 6.25

Trong kỹ thuật này, protein cùng những đúng theo chất hữu cơ khác vào các thành phần hỗn hợp thức ăn uống được phân diệt bởi axit sulfuric lúc có mặt hóa học xúc tác. Tổng nitơ hữu cơ được chuyển thành amoni sulfat thông qua quy trình phân diệt. Hỗn đúng theo thu được được hòa hợp với một bazơ và bác bỏ đựng. Sản phđộ ẩm chưng cất được thu lạitrong dung dịch axit boric. Các anion borat xuất hiện được chuẩn chỉnh độ bởi HCL chuẩn chỉnh hóa nhằm xác định lượng chất nitơ vào chủng loại.

Nhìn tầm thường, phương thức Kjeldahl tất cả điểm mạnh là được thực hiệnbởi vì các lắp thêm không phức tạp và có thể được triển khai vì chưng các nghệ thuật viên không nhiều kinh nghiệm.

Pmùi hương pháp Kjeldahl đã có xác định công nhận vì một trong những lượng phệ các ban ngành cơ quan chính phủ với những hiệp hội cộng đồng quốc tế như: AOAC , EPA, AACC, AOCS, ISO, USDA và các tổ chức triển khai không giống.

QUY TRÌNH PHƯƠNG PHÁP:

Phương thơm pháp này bao hàm 3giai đoạn: DIGESTION - DISTILLATION - TITRATION(Phân diệt – Chưng đựng – Chuẩn độ)

Phân bỏ làquá trình táchnitơ chứa trong số mẫu mã cơ học bằng phương pháp sử dụng hỗn hợp axit đậm đặc với được triển khai bằng cách hâm sôi mẫu vào axit sulfuric. Kết trái là một hỗn hợp amoni sulfat.

Amoniac được giải pđợi vào tiến trình DISTILLATION, được giữ giàng vào hỗn hợp với một lượng axit boric đang biết. Giai đoạn đầu, bác bỏ chứa được thực hiện theo phương thức bác cất hơi nước truyền thống lịch sử,việctăng tốc độ chưng cất sau đó giúp nhận được sản phẩm.

TITRATION được sử dụng ở đầu cuối ,nhằm sau cuối review lượng amoni bao gồm trong mẫu bác đựng.

CÁC PHẢN ỨNG THỰC HIỆN THEO PHƯƠNG PHÁPhường KJELDAHL

PHÂN HỦY/PHÁ MẪU

DIGESTION

catalysts→(1) n - C -NH2 + mH2SO4 CO2 + (NH4)2 SO4 + SO2protein heat→

NEUTRALIZATION AND DISTILLATION

(2) (NH4)2SO4 + 2 NaOH 2NH3 + Na2SO4+ 2H2O(3) NH3 + H3BO3 (boric acid) NH4 + H2BO3- (borate ions)

TITRATION

Các Anion borat (Xác Suất thuận cùng với lượng chất nitơ) được chuẩn độ bởi HCl chuẩn hóa (hoặc H2SO4)

(4) H2BO3- + H+ H3BO3

THỰC NGHIỆM - THIẾT BỊ CHUẨN BỊ

Trong trong những năm cách đây không lâu, các thứ new đang được phát triển cùng đổi mới công nghệ để triển khai các nghệ thuật phân tích này.

Hãng JPhường Selecta, nhấn thức được nhu cầu của những chống thí nghiệm, đã đoạt một sự chi tiêu không còn bé dại với nỗ lực đáng chú ý để đưa ra Thị trường một loạt thứ mới, ngày càng tối ưu, hoàn hảo, để giúp đỡ quá trình cải tiến và phát triển phương pháp Kjeldahl nâng caovận tốc, độ đúng chuẩn, và tác dụng lặp lại đúng mực.

Các máy khẳng định nitơ hữu cơ bao gồm bố cỗ trang bị cơ bạn dạng sau:

Sở phân bỏ mẫu/phá mẫuBộ cơ chế cung ứng ( Macro or Micro)

Gần trên đây, khối hệ thống phá mẫu tự động hóa mới, Aulớn Digest đôi mươi, đã có được bổ sung, tối ưu hóa thời giancùng chođộ tin tưởng cao cùng với các phòng phân tách chuyên nghiệp.

QÚA TRÌNH PHÂN HỦY/PHÁ MẪU

Một số ĐK liên quan, yếu tố đề xuất quan tâm vào quy trình phân diệt, khẳng định vận tốc phản bội ứng cùng phân diệt nitơ thành amoni sunfat, chẳng hạn như lượng nhiệt độ được truyền, lượng muối bột để tăng ánh nắng mặt trời sôi axit, chất xúc tác được áp dụng cùng thời hạn phân diệt.

Việc kiểm soát và điều chỉnh bất kỳ thông số nào trong các nguyên tố này mọi tác động cho phần sót lại. Đã tất cả các phân tích nhằm khẳng định những thông số kỹ thuật cần thiết để đạt được điều kiện buổi tối ưu tùy nằm trong vào ma trận mẫu mã.

lấy một ví dụ, lượng axit quan trọng đổi khác tùy trực thuộc vào lượng hóa học bự bao gồm trong mẫu. Lượng hóa học Khủng càng các thì càng đề xuất nhiều axit hơn. Nó cũng đổi khác theo thời hạn phân diệt.Thời gian phân hủy càng dài, càng nhiều axit bị mất bởi vì cất cánh khá. Thời gian phân bỏ phải được xác định tùy nằm trong vào lượng tịch thu bằng phương pháp sử dụng các mẫu đã biết.

Bổ sung muối để tăng nhiệt độ sôi của H2SO4, vấn đề thêm lượng muối bột là quan trọng nhằm quy trình hủy hoại nhanh khô hơn. Tùy thuộc vào nhiều loại muối bột được thực hiện, ánh nắng mặt trời có thể đi tự 330 °C chỉ riêng rẽ axit sulfuric, cho 400 °C Lúc tất cả muối bột, vì thế có tác dụng tăng tốc độ phân hủy/phá chủng loại và rút ngắn đáng chú ý thời hạn hủy diệt.

Để triển khai tiêu diệt, thông tmùi hương thực hiện kân hận gia sức nóng có tác dụng bởi nhôm cùng vỏ được phủ bọc vì chưng lớp bí quyết nhiệt độ dày với được đính ráp bên trên form thnghiền ko gỉ. Khối hận gia nhiệt độ bao gồm các form size khối khác nhau mang lại 6, 12 cùng 20 mẫu mã cùng lúc.

Yếu tố gia nhiệt độ là điện trsống sức nóng và được tinh chỉnh bởi vì một lắp thêm năng lượng điện tử phối hợp bộ vi xử lý có thể chấp nhận được người dùng gạn lọc cùng ghi ghi nhớ một số trong những chương trình làm việc cùng với phân đoạn sức nóng và thời gian hoàn toàn có thể lập trình tương đối đầy đủ. Khả năng lập trình điều đó cho phép buổi tối ưu hóa quy trình phân hủy.

QÚA TRÌNH PHÁ HỦY ĐƯỢC THỰC HIỆN TRONG 3BƯỚC

1. Tùy ở trong vào hàm lượng nước vào mẫu mã, bước đầu quy trình phân diệt bằng cách có tác dụng cất cánh khá nước sinh hoạt 150 °C vào 15 và nửa tiếng.

2. Thực hiện bước lắp thêm nhị từ 270 cho 300 °C trong tầm thời hạn từ bỏ 15 mang lại trong vòng 30 phút nhằm giảm lượng sương white sinh ra vào quá trình phá hủy

3. Tiếp tục phân bỏ sống 400 ºC trong 60 cùng 90 phút.

*

Kiểm thẩm tra trực quan tiền kết quả: Kết trái là chất lỏng nhìn trong suốt có màu xanh da trời nhạt, xanh lục hoặc quà tùy nằm trong vào chất xúc tác được sử dụng. Không còn dư lượng cặn kết tủa bám vào thành ống.

MỘT SỐ VÍ DỤ VỀ CHƯƠNG TRÌNH THƯ VIỆN VỚI MẪU ĐÃ CÓ:

Pho đuối hoặc thịt:

Step1: 150ºC / 30 ’ -> Step2: 270ºC / 30’ ->Step3: 400ºC / 90 ’

Ngũ cốc:

Step1: 150ºC / 15 ’ -> Step2: 300ºC / 15’ -> Step3: 400ºC / 60 ’

Các trang bị của J.Phường. SELECTA phù hợp tuyệt nhất đến tiến trình đối chiếu PHÁ MẪU MODEL "BLOC-DIGEST"

đặc điểm kỹ thuật:

o Kiểm thẩm tra ánh nắng mặt trời tự do.

o Kết nối RS-232 trực tiếp hai chiều được cho phép chuyển tải thông tin tài liệu chương trình ghi ánh nắng mặt trời của khối hận gia nhiệt với chương trình ghi cùng cổng liên kết RAT với máy tính xách tay.

o Đĩa CD phần mềm được hỗ trợ hẳn nhiên bộ phá mẫu. Phần mượt này chế tạo điều kiện được cho phép sửa đổi những chương trình chỉnh phân hủyvới cho phép chúng ta quan sát và theo dõi cùng lưu lại ánh sáng của cục hủy diệt mẫu

o Xử lý chủng loại ít hơn.

o Khối hận gia sức nóng bởi nhôm cải thiện tài năng đồng mọi Lúc gia nhiệt.

o Phạm vi ánh sáng từ bỏ 45 cho 450 °C.

o Bộ nhớ được lập trình sẵn ghi cho tới đôi mươi công tác nhiệt độ, cùng với 4 bước phân đoạn.

o Thời gian tối đa từng bước: 600 phút.

o Chỉ thị âm tkhô giòn lúc dứt công tác phá mẫu.

o Hai gradient nhiệt độ có thể lựa chọn: Kjeldahl / D.Q.O.

o Chình họa báo khi cảm ứng con đường nhiệt độ bị đứt gãy.

HỆ THỐNG CHIẾT TÁCH VÀ TRUNG HÒA KHÍ ĐỘC

Hệ thống có phong cách thiết kế quan trọng nhằm kêt nạp với dung hòa các khí axit tạo ra vào quá trình phá mẫu Kjeldahl.

Bao có cỗ lọc hút hòa hợp axit ngưng tụ với bơm tuần hoàn nước chế tạo thể tích chân hạn hẹp mang lại câu hỏi hút khí độc.

*

BỘ PHÁ MẪU HOÀN TOÀN TỰ ĐỘNG trăng tròn VỊ TRÍ ,MODEL AUTO DIGEST 20

Thiết bị triển khai quy trình phá chủng loại trọn vẹn auto, với mức giá đỡ mẫu xây dựng tự động nâng lên cùng hạ xuống.

Thiết bị có kết cấu kim loại cùng vỏ ko kể của giá giữ lại mẫu mã tự động được phủ epoxy. Giá đỡ ống phá mẫu được làm bởi một vật liệu quan trọng đặc biệt kháng bào mòn hóa học axit.

Đặc điểm:

o Thao tác mẫu auto.

o Nhiệt độ đồng nhất.

o Điều khiển tinh chỉnh và điều khiển tự động mang lại buổi tối nhiều trăng tròn công tác về ánh sáng, thời hạn và độ dài của mẫu sau khoản thời gian phân diệt cùng chạy / dừng hút ít khí độc.

o Cổng RS-232 kết nối cỗ ghi ánh sáng với chương chình hủy diệt trường đoản cú laptop.

o Hệ thống dung nạp khí độcnhưng không yêu cầu áp dụng tủ hút ít không tính.

Bộ hoàn hảo bao gồm:

o 1 kân hận gia nhiệt độ bởi kim loại có đôi mươi vị trí.

o 1 khối hệ thống nâng tự động hóa đến chủng loại.

o 1 Lập trình điều khiển và tinh chỉnh “Rat-2” cho những tiến trình thời gian / ánh sáng.

o 1 giáđỡ ống phá mẫu

o 1 cỗ thu khí

o bộ ống phá mẫu 20 ống * 250ml

*

QUY TRÌNH CHƯNG CẤT

Sản phẩm sau khi tiêu diệt thường xuyên được trộn loãng với nước không có amoniac nhằm sút tphát âm tác động ảnh hưởng của tất cả hổn hợp bao gồm cất tỷ lệ axit / muối hạt cao.

Phần Khủng NH3 được chưng cất cùng lưu lại vào dung dịch axit trong 5 đến 10 phút ít hâm sôi trước tiên, tuy thế tùy ở trong vào thể tích các thành phần hỗn hợp hủy diệt và phương thức tiếp theo, với thể tích ngưng tụ từ đôi mươi cho 140ml chiếm được thìgồm thểthuđược lượng nitơ hoàn hảo vào mẫu phá.

thường thì Việc bác chứa được yêu cầu nên chiếm được to hơn, tạo thành các nước hơn, tuy vậy vấn đề đó ko làm cho biến hóa hiệu quả lúc triển khai chuẩn độ.

Tốc độ bác bỏ chứa nhanh lờ đờ nhờ vào vào năng suất làm cho rét dừng tụ với kĩ năng sinh nhiệt trường đoản cú thành phần gia nhiệt độ.

Hệ thống gia nhiệt độ bằng khá nước tăng tốc độ để thực hiện bài toán bác bỏ đựng.

Sử dụng dung dịch axit Boric vẫn biết liều lượng, ko tuyệt nhất thiết buộc phải đề xuất độ đúng chuẩn cao, Lúc chuẩn chỉnh độ cần đo đúng đắn lượng amoniac bằng phương pháp trung hòa 1:1 tinh vi được sinh ra vị amoniac cùng axit boric. Trong thực tiễn, axit boric hoàn toàn có thể được phân phối để đảm bảo an toàn sự hấp thu hoàn toàn của amoniac.

Dung dịch thu được bắt buộc gia hạn sinh hoạt 45 °C để tách mất amoniac.

Các lắp thêm của J.P. SELECTA cân xứng độc nhất vô nhị mang đến các bước chưng chứa với các chống nghiên cứu có bài bản nhỏ, mức độ vừa phải cân nặng so sánh mẫu rất hiếm là: PRONITRO “M” với PRONITRO “S”.

Pronitro M với khoảng độ tự động hóa cân xứng,cung ứng hoạt động đơn giản dễ dàng và bình yên. Nó phù hợp mang lại phòng xem sét so với với trọng lượng mẫu nhỏ tuổi hoặc trung bình

Tính năng, quánh điểm:

o Thiết bị chưng chứa tương đối nước.

o Máy sinh sản hơi nước nhỏ dại gọn gàng với công tắc áp suất đảm bảo an ninh thừa sức nóng và vượt áp suất.

o Cửa bình an, ngừng bác cất lúc cửa ngõ mở.

o Phát hiện sự hiện hữu của ống phân diệt / chưng đựng. Thiết bị này giới hạn định lượng NaOH giả dụ không có ống.

o Bộ phối kết hợp thông thường mang đến ống phân diệt / bác cất MACRO (Ø 42 mm) với MICRO (Ø 26 mm).

o Các bể cất H2O cùng NaOH được đặt phía bên trong sản phẩm, góp tiết kiệm chi phí không khí trong phòng phân tách.

o Vỏ bằng thép ko gỉ cùng khía cạnh trước bằng nhựa ABS.

o Sở kít chuẩn độ auto.

Thông số kỹ thuật:

o Khoảng đo: từ 0,2 cho 200 mg nitơ .

o Thời gian bác đựng có thể lập trình.

o Thu hồi nitơ: > 99,5%

o Tốc độ bác cất: từ 35 mang đến 40 ml / phút.

o Thời gian bác cất điển hình: từ 7 mang đến 10 phút ít.

o Tỷ lệ tiêu thụ nước: từ bỏ 80 mang lại 100 lkhông nhiều / h.

o Tiêu trúc nước từ thứ tạo hơi nước: 2,5 lkhông nhiều / h.

Xem thêm: Điều Hòa 1 Cục Cũ Rẻ Hơn 50%, Có Nên Mua Điều Hòa 1 Cục Hay Không

o Dung tích bể cất nước đến sản phẩm chế tạo hơi nước: 6 lít.

o Dung tích bể đựng NaOH: 2 lít.

*

QUY TRÌNH CHUẨN ĐỘ

Axit Boric bả (bắt) khí amoniac và tạo thành thành một phức tạp amoniac boric. Khi amoniac bị bắt, màu của dung dịch nhận thay đổi. Tiến hành các bước nhỏng sau:

Chuẩn độ bác bỏ chứa bằng HCl hoặc H2SO4 cho tới Khi đổi khác màu sắc (Điểm kết thúc: pH 4,65)

Phân tử gam HCL = phân tử gam NH3 = phân tử gam N vào mẫu

Phân tử gam H2S04 = 2 phân tử gam NH3 = 2 phân tử gam N trong mẫu

Trên thực tế, những chỉ số không giống nhau hoàn toàn có thể được thực hiện để có được một thông số điểm rẽ sạch sẽ với dung nhan đường nét tốt nhất có thể.

Nếu cực nhọc phạt hiện nay điểm gửi, rất có thể hữu ích khi sử dụng dung dịch Trắng nhằm tsay mê chiếu

TÍNH TOÁN

lúc thực hiện tính toán, chúng ta phải tính mang đến dung dịch cảm nhận và các yếu tố trộn loãng được sử dụng vào quy trình chưng cất. Tài liệu xem thêm hoàn toàn có thể được áp dụng với các phương pháp tđam mê chiếu đã xuất bản.

Thực hiện nay phép tính:

mg N = N x V x 14

Trong đó:

N = Axit chuẩn chỉnh độ.

V = Lượng axit tiêu thụ.

14 = Trọng lượng ngulặng tử.

• Để chuyển quý phái hàm lượng protein cân xứng, thì sửa nó theo tmê man số tương thích tùy thuộc vào đặc điểm của mẫu (khoác định là 6.25)

• Định kỳ tiến hành một phép test demo mẫu White cùng trừ nó khỏi hiệu quả.

% Proteins = P2/P0 x 100 x F

Trong đó:

P2: Nitơ (mg).

P0: Trọng lượng chủng loại (mg).

F: Tmê say số protein.

(tsay mê số khoác định là 6.25)

MÁY CHƯNG CẤT VÀ CHUẨN ĐỘ TỰ ĐỘNG HOÀN TOÀN

*Model:PRO-NITRO “A”

Đây là hệ thống trọn vẹn tự động,tích hợphệ thống chuẩn độ "on-line" (chuẩn độ theo thời gian thực). Thiết bị so sánh tất cả tính khối hệ thống, độ đúng mực cao với không mất nhiều nguồn lực bạn thực hiện, tiện lợi làm cho việccùng an toàn. Thích thích hợp mang lại chống thể nghiệm phân tíchcùng với cân nặng mẫu mã mức độ vừa phải hoặc lớn.

PRO-NITRO “A” tiến hành vấn đề bác bỏ chứa cùng chuẩn độ tự động hóa theo thời hạn thực, cho nên vì thế góp rút ngắn thời hạn thực hiện phân tích.

Thiết bị tích hợp một số loại chuẩn độ này cung ứng một điểm mạnh xẻ sung: nó phát hiện tại điểm cơ mà tại kia chủng loại không còn tạo thành Nitơ, đặc điểm này được thực hiện nhằm dừng bác bỏ bỏ vào đúng thời điểm với cho nên vì thế đảm bảo rằng thời hạn bác bỏ cất luôn luôn buổi tối ưu đến câu hỏi thu hồi nitơ tối đacùng bài toán kéo dài chưng cất không thể cần thiết nữa.

Phnghiền đo Color (so màu) được gật đầu đồng ý bởi AOAC cùng không yêu cầu hiệu chuẩn chu trình.

Tính năng, sệt điểm:

o Thiết bị bác bỏ cất khá nước.

o Tự đụng «On-line» reviews Màu sắc.

o Máy tạo nên hơi nước với công tắc áp suất đảm bảo an toàn an ninh ánh nắng mặt trời vượt nhiệt và bảo đảm an toàn thừa áp.

o Cửa an ninh ngăn/ dứt bác chứa nếu cửa mở.

o Phát hiện sự hiện diện của ống chưng cất / phá hủy. Thiết bị này giới hạn định lượng NaOH nếu không tồn tại ống.

o Sở kết hợp chung cho ống phân hủy / chưng đựng MACRO (Ø 42 mm) và MICRO (Ø 26 mm).

o H2O với NaOH, axit boric với HCl được đặt phía bên trong vật dụng, góp tiết kiệm không gian vào chống thể nghiệm.

o Hệ thống nước thải của ống phân hủy / bác đựng với được thu.

o Dừng bác bỏ cất tự động hóa.

o Màn hình LCD Khủng trăng tròn x 4 ký kết trường đoản cú.

o Đầu ra RS-232 để in kết quả.

o Vỏ bằng chất liệu thép không gỉ cùng phương diện trước bằng nhựa ABS.

Thông số kỹ thuật:

o Khoảng đo: từ bỏ 0,2 cho 200 mg nitơ.

o Tỷ lệ tịch thu nitơ:> 99,5%.

o Tốc độ chưng cất: trường đoản cú 35 cho 40 ml / phút ít.

o Tỷ lệ tiêu thú nước: từ 80 cho 100 lkhông nhiều / h.

o Tiêu trúc nước của sản phẩm tạo thành tương đối nước: 2,5 lít / h.

o Dung tích bể đựng nước mang lại sản phẩm công nghệ chế tác tương đối nước: 6 lkhông nhiều.

o Dung tích bể cất NaOH: 2 lít.

o Dung tích bể đựng axit Boric: 2 lít.

o Dung tích bể chuẩn độ: 2 lít.

o Độ chính xác của chuẩn độ: 1,5%.

o Liều lượng buổi tối tgọi của chuẩn độ: 0,01 ml.

*

THỰC NGHIỆM

XÁC ĐỊNH PROTEIN TỔNG BẰNG PHƯƠNG PHÁPhường KJELDAHL

1.Ngulặng lý:

Phương thơm pháp này bao gồm vấn đề khoáng hóa mẫu mã bởi axit sulfuric đậm quánh và kiềm hóa bằng natri hydroxit. Việc giải pđợi amoniac được thực hiện bằng phương pháp bác đựng và thu lại bên trên axit boric. Tiếp theo chuẩn chỉnh độ cùng với axit clohydric có thể chấp nhận được tính hàm vị protein lúc đầu tất cả trong mẫu mã.

2. Thuốc test buộc phải thiết:

o Axit sulfuric 96% (d = 1,84).

o NaOH, hỗn hợp 35% (w / v).

o Chỉ thị các thành phần hỗn hợp, quan trọng đặc biệt đối với chuẩn độ amoniac.

o Chất xúc tác Kjeldahl.

o Axit boric 4% (w / v).

o HCl 0,25N

o Nước cất.

o Đá bong bóng dạng phân tử.

Lưu ý: Điều đặc biệt quan trọng là toàn bộ các thuốc thử hoàn toàn không tồn tại nitơ.

3. Trang trang bị nên thiết:

o Cân phân tích, độ sắc nét 0,1 mg

o Digestor (Bloc-Digest).

o Lập trình tiến trình RAT.

o Tủ/ quạt hút ít khí độc

o Pro-Nitro “M” hoặc Pro-Nitro “A”

o Burette nhằm chuẩn chỉnh độ.

4. Phá mẫu:

o Cân khoảng 1 gram mẫu mã hoàn toàn được xay nhỏvới được đồng hóa trong giấy không cất nitơ với bỏ vào ống phân diệt.

o Thêm 10 g chất xúc tác Kjeldahl, 25 ml axit sulfuric 96% (d = 1,84) cùng một vài hạt đá bọt đã có được cách xử lý vào ống mẫu mã.

o Đặt các ống phân bỏ với những mẫu mã vào trong kân hận phân diệt, đặt trong gầm tủ hút ít khí độc.

o Phân hủy/phá chủng loại hoàn toàn có thể được tiến hành ở ánh sáng giữa 350 ~4trăng tròn °C và trên thời gian triển khai rất có thể mất từ là 1 mang đến 2h.

o Cuối thuộc, chất lỏng nhận được là màu xanh lá cây lá cây trong veo hoặc greed color tùy nằm trong vào chất xúc tác được thực hiện.

o Để mẫu mã nguội xuống nhiệt độ phòng.

o Tránh kết tủa bằng phương pháp thỉnh thoảng khuấy, lắc.

o Thực hiện tại thao tác lừ đừ đưa liều lượng 50 ml nước cất cho vào trong những ống mẫu (cẩn thận dophản nghịch ứng mạnh).

o Để chủng loại nguội xuống ánh nắng mặt trời phòng.

o Nếu kết tủa xẩy ra, hãy khuấy nhẹ hoặc gia nhiệt.

5. Chưng cất

Định lượng 50 ml axit boric trong bình Erlenmeyer với một vài giọt thông tư các thành phần hỗn hợp. Lưu ý, bình Erlenmeyer nên được dìm vào axit boric.

Khi ống chủng loại cùng bình Erlenmeyer gồm axit boric được đặt, định lượng 50ml NaOH và bước đầu bác bỏ chứa.

Chưng cất đề xuất được kéo dãn đủ lâu nhằm bác chứa tối thiểu 150 ml, khoảng tự 5 mang đến 10 phút ít.

6. Test chủng loại trắng

Sau lúc bác chứa mẫu, thực hiện phép thử White bằng phương pháp thực hiện phương thức được biểu hiện ở trên, nhưng thực hiện 5 ml nước cất.

7. Chuẩn độ

Chuẩn độ dung dịch bác bỏ đựng nhận được bởi axit clohydric 0,25N cho đến khi dung dịch rời tự greed color sang màu tím.

-Tính toán thù lượng nitơ gồm mặt:

% Nitrogene = 14 x (V1-V0) x N / P

% Protein =% Nitơ x F

Trong đó:

P = Trọng lượng mẫu (g)

V1 = Thể tích HCl được tiêu thụ vị chuẩn chỉnh độ (ml)

N = HCl

V0 = Thể tích HCl được tiêu thú bằng chuẩn độ mẫu mã trắng (ml)

F = Hệ số thay đổi chuyển tự hàm lượng nitơ sang hàm lượng protein. Đối với protein thô, quý hiếm của 6,25 thường xuyên được thực hiện. Để có độ đúng chuẩn cao hơn, những hệ số đưa biến đổi hoàn toàn có thể được áp dụng bằng cách khác nhau quality protein theo tính chất mẫu.